一文与您分享液相色谱C18预柱的操作方法
浏览次数:552发布日期:2023-03-10
液相色谱C18预柱是一种重要的色谱柱,主要用于样品预处理和前处理。液相色谱C18预柱是以C18为主要填料材料的柱体,其原理是利用C18固定相对样品进行分离。C18固定相具有亲水性和疏水性,可根据样品的亲水性和疏水性进行选择性分离。C18固定相的表面活性基团是十八烷基,它能够与样品中的疏水基团发生疏水相互作用,从而实现疏水性分离。
下面介绍液相色谱C18预柱的操作方法。
1.样品制备
首先需要准备好待测样品。样品可以是生物、环境或食品样品等。样品制备时要注意样品的稳定性和溶解度,尽可能将样品溶解于合适的溶剂中。
2.处理
首先将该产品放入色谱仪中,并用流动相(纯水或有机溶剂)进行净化,去除残留物。
3.样品的进样
使用微量注射器将样品注入预柱,并调整流速和流量以使样品进入柱。样品进入柱后,可以加入更多流动相以保证样品均匀分布在柱中。
4.流动相的处理
接下来,需要将流动相逐渐转换为含有酸、碱或缓冲液的溶液。这样可以帮助保持柱的稳定性并避免样品集中在某些局部影响分离效果。
5.柱洗涤和后处理
处理结束后,需要用纯溶剂清洗柱。可以使用等体积的乙腈和水进行清洗,使柱内的残留物清除干净。
6.柱存储
后需要将预柱用纯溶剂进行洗涤,然后将其放入存储液中存放。存储液可以是酒精、乙腈或水,长期储存可以冷藏或放置在阴凉处。
总之,液相色谱C18预柱是一种重要的色谱柱,能够有效地前处理样品并获得高质量的分离效果。操作时需要注意处理流程和注意维护柱的稳定性。