糖化柱管是高效液相色谱系统中用于分离和定量检测糖化血红蛋白(HbA1c)的核心耗材,其性能直接决定糖尿病诊断与疗效评估的准确性。该柱多采用阳离子交换或亲和层析原理,对血液样本中HbA1c、HbA0及其他变异体进行高分辨分离。若使用不当,易导致峰形畸变、保留时间漂移、柱压升高甚至损伤。遵循
糖化柱管标准化、精细化的操作流程,才能实现上样稳、分离清、结果准。

一、使用前准备
核对柱型号与系统匹配:
确认柱管品牌与仪器方法参数一致;
安装方向正确:
柱体标有流向箭头,必须与流动相方向一致,反接将破坏填料床;
系统平衡:
以推荐流速(通常0.8–1.2 mL/min)泵入起始缓冲液(如低盐磷酸盐缓冲液),冲洗≥20柱体积,直至基线稳定(压力、电导、UV信号波动<2%)。
二、样本处理与上样规范
样本要求:
全血样本需抗凝,离心后取上清,避免溶血或脂血;
样本过滤(0.45 μm或0.22 μm滤膜)或离心澄清,防止颗粒堵塞柱头;
进样量控制:
严格按方法设定(通常20–50 μL),超量会导致峰重叠或柱过载;
进样频率:
连续运行时,每5–10针插入空白或清洗针,减少残留累积。
三、运行过程监控
实时观察参数:
柱压应稳定在正常范围(如3–6 MPa),突升提示堵塞;
保留时间偏移>0.1 min需排查温度、流速或缓冲液pH变化;
避免恶劣条件:
流动相pH须在柱耐受范围内(硅胶柱pH 2–8,聚合物柱可耐pH 1–14);
温度控制在30–40℃(依方法而定),波动≤±0.5℃。
四、使用后维护
立即冲洗:
运行结束后,先用高盐洗脱液冲洗5–10柱体积,再换保存液(如20%乙醇)冲洗10柱体积;
密封保存:
拧紧柱两端堵头,4℃避光存放,防止干裂或微生物滋生。