糖化血红蛋白检测是糖尿病诊断与长期血糖控制评估的标准，而基于离子交换层析原理的糖化血红蛋柱管因其成本低、操作简便，仍在基层医疗和资源有限地区广泛应用。尽管看似操作简单，但若使用不规范，易导致结果偏差、重复性差甚至误诊。掌握
糖化血红蛋柱管科学、严谨的使用方法，是实现分离清晰、定量准确、结果可靠的关键。
一、使用前准备：三查三净原则
查试剂有效期：确认柱管、溶血剂、洗脱液均在有效期内，无沉淀或变色；
查样本状态：全血样本应EDTA抗凝，无溶血、脂血或凝块，采集后7天内检测；
查环境条件：室温稳定（18–25℃），避免阳光直射或强气流干扰层析过程。
二、规范操作流程
样本预处理
取适量全血（通常25–50μL）加入溶血剂中，充分混匀，静置5–10分钟使红细胞裂解；
混合液需澄清透明，若有絮状物应离心（3000rpm,5min）取上清。
上样与层析
轻轻颠倒柱管使填料均匀沉降，打开下端塞子让缓冲液自然流出至填料表面；
用移液器缓慢将溶血液沿管壁加入柱中，切勿冲散填料层；
待样本渗入填料后，加入第一种洗脱液（通常为低离子强度缓冲液），洗脱HbA0等非糖化组分；
再加入第二种洗脱液（高离子强度），洗脱HbA1c组分，收集对应洗脱液于比色管中。
比色测定
用分光光度计在指定波长（如415nm）测定各组分吸光度；
按公式计算：HbA1c%=（HbA1c吸光度/总血红蛋白吸光度）×100%；
建议每批检测包含质控样本（正常/异常水平）以验证准确性。
三、质量控制建议
每月参与室间质评（EQA），确保结果可比性；
建立室内质控图，监控批内/批间变异系数（CV应＜5%）；
若结果与临床不符（如HbA1c与指尖血糖差异过大），应复查或改用HPLC/免疫法确认。
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更新时间：2025-12-08 
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